胰-蛋白酶Trypsin from porcine pancreas

产品名称： Sigma 胰-蛋白酶 来源于猪胰腺（Trypsin from porcine pancreas）

产品货号： T4799-10G

产品规格：

产品形态：冻干粉（lyophilized powder）

产品等级：BioRegrade，适用于细胞培养-

比活度：1,000-2,000 BAEE units/mg solid

分子量：23.8 kDa

浓度：25 mg/mL

CAS号：9002-07-7

EC号：232-650-8

MDL号：MFCD00082094

运输条件：常温

储存温度：-20℃

生物来源：猪胰腺

包装规格：5g、10g、25g、100g、500g

保质期：24个月

胰-蛋白酶Trypsin from porcine pancreas供应商：华雅思创

产品概述：

做细胞培养的科研人员应该都深有体会——贴壁细胞传代是实验室的“日常操作"，但细胞消化这一步却常常让人头疼：消化时间短了，细胞不下来；消化时间长了，细胞又容易受损，活性大幅下降。更麻烦的是，不同细胞系对胰·酶的敏感度差异很大，浓度、温度、处理时间都得反复摸索，稍有不慎整瓶细胞就废了。

Sigma 胰-蛋白酶 来源于猪胰腺（货号T4799-10G）就是专门来解决这些问题的。Sigma 胰-蛋白酶属于BioReagent级别，专为细胞培养应用而优化-。它能特异性切割赖氨酸和精氨·酸残基的C末端肽段，是使贴壁细胞从培养表面脱落的核心工具酶-。T4799-10G作为10g规格的包装，非常适合需要频繁进行细胞传代和蛋白质研究的实验室日常使用。

买试剂，找华雅，华雅思创现货供应：胰-蛋白酶Trypsin from porcine pancreas，欢迎咨询

说明

General description

凭借有效的作用和对不同类型细胞的耐受性以及血清诱导的中和作用，胰-蛋白酶可用于组织解离。

Application

来自猪胰腺的胰-蛋白酶已被用于消化鸡骨头。它还被用于分离黄体内皮细胞。。

对于胰-蛋白酶消化肽，胰-蛋白酶:肽的使用比例约为1:100至1:20。本品的典型用途是使贴壁细胞从培养表面脱落。 使细胞解离所需的胰-蛋白酶浓度主要取决于细胞类型和培养物代数。 Trypsins也被用于细胞培养过程中的细胞再悬浮，在蛋白质组学研究中用于蛋白质的消化，以及在各种凝胶消化中。 其他的应用包括通过基于膜的技术评估结晶，以及在一项研究中确定蛋白质折叠速率和产量可以被动力学陷阱的存在所限制。

Biochem/physiol Actions

胰-蛋白酶可切割赖氨酸和精氨·酸残基的C末端肽段。 如果酸性残基位于切割位点的任意一侧，则该反应的水解速度减慢，并且如果脯·氨酸残基位于切割位点的羧基侧，则水解停止。 胰-蛋白酶活性的最佳pH条件为7-9。 胰-蛋白酶还可以切割氨基酸合成衍生物的酯和酰胺键。 将EDTA添加到胰-蛋白酶溶液中作为螯合剂，用于中和钙离子和镁离子以防止其抑制胰-蛋白酶活性。 去除这些离子会增加酶活性。

丝氨·酸蛋白酶抑制剂（包括DFP、TLCK、APMSF、AEBSEF和抑肽·酶等）会抑制胰-蛋白酶。

Preparation Note

本品为冻干粉，可以25mg/mL溶于Hank′s平衡盐。溶液。
对于需要EDTA的应用，溶解胰-蛋白酶应该使用不含Ca2+ 或 Mg2+的缓冲盐溶液.

Other Notes

一个BAEE单位以BAEE作为底物，在25°C、pH 7.6条件下每分钟每毫升产生0.001的ΔA253 。一个BTEE单位=320个ATEE单位。反应体积=3.2mL（1cm的光径）。

胰-蛋白酶是由含223个氨基酸残基的单链多肽组成的，它通过切割胰蛋-白酶原的Lys-1le肽键以去除N-末端六肽而获得。 氨基酸序列通过6个二硫键交联。 这是天然形式的胰蛋-白酶——β-胰蛋-白酶。 β-胰蛋-白酶可以自溶，在Lys-Ser残基处断裂，产生α-胰蛋-白酶。 胰-蛋白酶是丝·氨酸蛋白酶家族的成员。

Disclaimer

溶于1mM HCl的溶液分装后可在-20℃稳定保存1年。Ca2+ 的存在也会降低胰蛋-白酶的自水解性，保持其在溶液中的稳定性。 胰蛋-白酶也将在2.0 M尿素、2.0 M盐酸胍或0.1% (w/v) SDS中保持大部分活性。