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| 品牌 | 其他品牌 | 货号 | CW2105S |
|---|---|---|---|
| 供货周期 | 现货 | 应用领域 | 医疗卫生,生物产业,制药/生物制药,综合 |
想了解:CW2105S、无内毒素质粒中提、5–15mL 菌液、转染级质粒、去内毒素、硅基质膜、康为世纪产品,就找华雅思创生物
货号:CW2105S
产品名称:CW2105S 无内毒素质粒中提试剂盒(5-15mL)盒(EndoFree Plasmid Midi Kit)
品牌:康为世纪
处理菌液体积:5–15 mL(高拷贝质粒)
规格:50 preps(50 次提取)
质粒产量:最高 100 μg / 次
质粒纯度:OD260/280=1.8–1.9;OD260/230≥2.0
内毒素残留:≤0.1 EU/μg(转染级标准)
核心技术:碱裂解法、硅基质膜吸附、Endo-Free Buffer ER 去内毒素
特色指示剂:CWBlue(裂解 / 中和颜色指示,避免操作失误)
适用质粒:高拷贝、低拷贝、粘粒北京市公共资源交易服务平台
应用场景:细胞转染(293/CHO)、AAV/LV 包装、体外转录、酶切、测序、PCR
储存条件:室温 15–30℃;RNase A 2–8℃保存,有效期 12 个月
操作时长:约 50 min / 批次
试剂盒组分(50 次装)
Buffer P1:30 mL(含 RNase A,重悬菌体)
Buffer P2:30 mL(裂解液,SDS+NaOH)
Buffer E3:30 mL(中和液,含 CWBlue 指示剂)
Buffer PS:15 mL(去内毒素缓冲液)
Buffer PW(浓缩):10 mL(漂洗缓冲液,需稀释)
Endo-Free Buffer EB:10 mL(无内毒素洗脱液,pH8.5)
离心吸附柱 DQ:50 个
收集管:50 个
RNase A(10 mg/mL):600 μL
产品核心优势
转染级无内毒素,保障高效转染
专用 Endo-Free Buffer ER 高效去除内毒素,残留≤0.1 EU/μg,避免内毒素引发细胞应激、转染效率下降,适配 HEK293、CHO、Expi293 等高要求转染场景。
高纯度高得率,批次稳定
硅基质膜特异性吸附质粒,去除基因组 DNA、蛋白、多糖;CWBlue 颜色指示(裂解蓝→中和无色),规避操作误差,纯度稳定(OD260/280=1.8–1.9),得率可达 100 μg / 次。
操作简便快速,无需酚氯仿
全程离心操作,50 min 完成 50 次提取;无酚氯仿、无有毒试剂,安全环保,适配实验室常规离心机,无需特殊设备。
通用性强,适配多场景
适配 5–15 mL 高 / 低拷贝菌液,提取质粒可直接用于细胞转染、病毒包装、体外转录、酶切、测序、PCR,满足科研与小规模量产需求。
高性价比,现货供应
国产替代进口(如 Qiagen EndoFree),价格更优、批次稳定;华雅思创生物现货直发,。
标准操作流程(50 min)
菌体收集:取 5–15 mL 过夜菌液,8000 g 离心 3 min,弃上清。
重悬裂解:加 250 μL Buffer P1(含 RNase A)重悬;加 250 μL Buffer P2,轻柔颠倒混匀(溶液变蓝),室温静置 5 min。
中和去蛋白:加 350 μL Buffer E3,颠倒混匀至蓝色消失,室温静置 5 min;12000 g 离心 10 min,取上清。
柱吸附:上清转移至吸附柱 DQ,12000 g 离心 1 min,弃废液。
去内毒素:加 500 μL Buffer PS,12000 g 离心 1 min,弃废液。
漂洗:加 750 μL 稀释后 Buffer PW,12000 g 离心 1 min,弃废液;空管离心 2 min,去除残留乙醇。
洗脱:吸附柱转移至新离心管,加 50–100 μL Endo-Free Buffer EB,室温静置 2 min,12000 g 离心 1 min,即得无内毒素质粒。
保存:质粒 - 20℃分装保存,避免反复冻融。
常见问题解答
内毒素残留是否影响转染?
是。内毒素 > 0.1 EU/μg 会激活 TLR4 通路,导致细胞凋亡、转染效率骤降;本试剂盒残留≤0.1 EU/μg,适配转染与病毒包装。
CWBlue 指示剂作用?
裂解后溶液变蓝(碱性),中和后蓝色消失(中性),直观判断裂解 / 中和是否充分,避免基因组 DNA 污染与得率下降。
低拷贝菌液适用吗?
适用。低拷贝建议 15 mL 菌液,得率约 30–50 μg,纯度与内毒素标准不变。
可用于病毒包装质粒提取吗?
适配。无内毒素、高纯度质粒可显著提升 AAV/LV 包装效率与病毒滴度。
保质期与储存注意?
室温 15–30℃可存 12 个月;RNase A 需 2–8℃保存,避免失效;Buffer PW 浓缩液需按比例稀释后使用。
CW2105S 无内毒素质粒中提试剂盒(5-15mL)是国产转染级质粒提取,以高纯度、低内毒素、高得率、操作简便、性价比高为核心优势,适配细胞转染、病毒包装、体外转录等高要求实验。50 次规格适配实验室长期使用与小规模量产,华雅思创生物原装现货、致力为分子生物学实验提供稳定可靠的核酸提取解决方案。