Inspire Spark PrimeRNP Kit基因编辑试剂盒

产品名称：Inspire Spark® PrimeRNP Kit（基因编辑试剂盒）

货号：MJ5460

规格：50 rxn

Inspire Spark PrimeRNP Kit基因编辑试剂盒，华雅思创现货供应，欢迎咨询

组分：

Solution I (eSpCas9)：75μL（1.5 μL/rxn）

Solution II (buffer)：2.5mL（50 μL/rxn）

储存条件：

短期：解冻后-20℃（避免反复冻融）

长期：未开封-80℃；开封后长期不用需-80℃

有效期：18个月

核心技术与优势

自递送CRISPR/SpCas9系统：

无需电转仪，直接原代细胞（如T细胞）和细胞系高效编辑。

敲除（KO）/敲入（KI）效率：85-90%

低脱靶率 + 无细胞毒性

实验流程（以人原代T细胞为例）

一、转导复合物制备

混合1.5μL SgRNA（100μM） + 1.5μL Solution I → 37℃孵育5-10分钟（形成RNP）。

加50μL Solution II（室温预平衡） → 混匀后室温静置5分钟。

二、细胞转导

细胞预处理：激活T细胞48小时后洗涤，离心去培养基（用OptiMEM/PBS清洗残留）。

细胞沉淀重悬于转导复合物 → 37℃孵育45分钟。

三、培养与检测

加600μL含10% FBS + 200U IL-2的T细胞培养基 → 接种至24孔板（密度2-3×10⁶/mL）。

培养4-5天后检测编辑效率。

关键注意事项

应用场景 操作要点

AAV辅助KI AAV体积≤5μL：RNP制备阶段加入；>5μL：细胞培养阶段加入（MOI: 2×10⁴-5×10⁴）

多基因编辑 方案A：混合多靶点RNP；方案B：分步转导（间隔48小时，≤2基因/次）

细胞状态 转导前活性>90%

电转兼容性 Solution I（eSpCas9）可单独用于电转 → 效率较野生型提升30%

产品名称：Inspire Spark® PrimeRNP Kit（基因编辑试剂盒）

货号：MJ5460

规格：50 rxn

Inspire Spark PrimeRNP Kit基因编辑试剂盒，华雅思创现货供应，欢迎咨询