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pcr试剂盒的使用方法

发布时间:2022-02-11

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   PCR试剂盒原理是由一对引物介导,能在动植物体外对特定基因(DNA)片断进行快速酶促扩增,经过n个热循环扩增,扩增产物中所含特定基因数是原始模板数的(1+E)n(0<E<1,扩增效率=倍,使得检测扩增产物中的特定基因成为可能。
  使用方法:
  一、稀释PCR阳性对照(以10E2-10E7拷贝/μL这6个10倍稀释度为例)
  1. 注意:由于标准品浓度非常高,因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行,千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分)。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原,本产品不提供活体样品做阳性对照,只提供可以直接使用的DNA片段作为阳性对照。
  2. 标记6个离心管,分别为7,6,5,4,3,2。
  3. 用带芯枪头分别加入45 μL荧光PCR模板稀释液(用带芯枪头,下同)。
  4. 在7号管中加入5 μL 1×10E8拷贝/μL 的阳性对照,充分震荡1分钟,得1×10E7拷贝/μL的阳性对照。放冰上待用。
  5. 换枪头,在6号管中加入5 μL 1×10E7拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得),充分震荡1分钟,得1×10E6拷贝/μL的阳性对照。放冰上待用。
  6. 换枪头,在5号管中加入5 μL 1×10E6拷贝/μL的阳性对照到5号管中,充分震荡1分钟,得1×10E5拷贝/μL的阳性对照。放冰上待用。
  7. 重复上面的操作直到得到6个稀释度的阳性对照。放冰上待用。
  产品及特点:
  1. 即开即用,用户只需要提供伴放线放线杆菌样品。
  2. 根据伴放线放线杆菌保守序列设计的专一性引物,与相关病毒无交叉反应。
  3. 灵敏度可以达到几百拷贝/反应。
  4. 一管式荧光定量PCR检测,避免后续污染。
  5. 产品仅用于科研本试剂盒足够50次20μL反应体系的荧光定量PCR。
  运输及保存:
  低温运输,-20℃保存,保存期限一年。
  自备试剂
  DNA模板、10×ROX(根据机型决定,具体见使用方法)。