Sigma A6964-100ML Accutase无菌细胞解离液

• 货号：A6964-100ML

• 品牌：Merck-Sigma

• 产品名称：Accutase® 溶液（细胞解离液）

• 规格：100mL

• 形态：液体，无菌过滤

• 酶活：400–600 units/mL

• 溶剂体系：无钙镁 DPBS 缓冲液，含蛋白水解酶与胶原水解酶

• pH 范围：6.8–7.8

• 内毒素：≤1 EU/mL

• 储存条件：-20℃保存，干冰运输

• 适用方向：哺乳动物细胞培养、单细胞分析、贴壁细胞传代

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产品介绍：

Accutase® 溶液是一种即用型、无菌过滤的细胞解离试剂，含有蛋白水解酶和胶原蛋白水解酶的复合配方，可在不含 Ca²⁺ 或 Mg²⁺ 的 Dulbecco‘s PBS 中发挥作用。该产品不含任何哺乳动物或细菌来源的成分，可作为胰蛋·白酶的直接替代品，适用于从标准组织培养塑料器具和粘附涂层塑料器具中常规解离细胞。

技术原理

Accutase® 的核心技术优势源于其独特的酶学组成与作用机制：

1. 双酶协同作用

Accutase® 由蛋白水解酶和胶原蛋白水解酶组成，能够同时模拟胰蛋·白酶和胶原酶的作用-。其作用机制在于温和地水解细胞间黏附分子（如钙黏蛋白、整合素配体）以及细胞外基质成分（如纤维连接蛋白、层粘连蛋白），同时切断细胞与培养基质表面的部分蛋白结合，从而实现细胞的解离。

2. 高效低浓度配方

由于 Accutase® 的酶解效率远高于哺乳动物胰蛋·白酶和胶原酶，因此其配方浓度可以更低，从而降低了对细胞的毒性和损伤。

3. 无动物源与细菌源成分

Accutase® 不含任何哺乳动物或细菌衍生的产品，这一特性使其在需要避免外源成分干扰的实验（如细胞表面标记分析、病毒生长检测）中具有独特优势。

核心优势

✅ 温和消化，保护细胞表面抗原

Accutase® 属于温和型的细胞解离酶混合物，在消化过程中对细胞表面蛋白的切割程度较轻，能够有效减少对细胞膜的损伤。研究表明，Accutase® 处理后的细胞能够保持完好的表面抗原，多数细胞表面标志物（包括 CD14、CD117、CD49f 和 CD29 等）不受影响。这对于后续的流式细胞分析、细胞分选和免疫表型分析至关重要。

✅ 维持高细胞活力

与胰蛋·白酶相比，Accutase® 在解离细胞时能显著提高细胞活力。一项针对人胚纹状体来源神经干细胞的研究显示，Accutase® 消化后的活细胞比例为（91.65±4.43）%，而胰蛋·白酶仅为（83.10±6.76）%（P<0.05）-。即使在长时间消化条件下，Accutase® 仍可保持 90% 以上的细胞活力。

✅ 无需中和步骤，操作简便

使用 Accutase® 消化细胞后，无需额外清洗或进行酶活终止反应，大大节省了实验时间，提升了传代效率。消化后的细胞可直接进行计数和传代，简化了操作流程。

✅ 广泛的细胞类型适用性

Accutase® 适用于绝大多数原代细胞和哺乳动物细胞系，以及昆虫细胞。经应用测试的细胞类型包括人胚胎干细胞、人间充质干细胞、人神经干细胞、巨噬细胞、成纤维细胞、角质形成细胞、血管内皮细胞、肝细胞以及贴壁 CHO、BHK、293 等细胞系-。在消化传统方法中较为困难的细胞类型时，Accutase® 往往展现出更理想的效率-。

适用研究领域

Accutase® 溶液适用于以下研究方向和应用场景：

干细胞研究：人胚胎干细胞（hESCs）、诱导多能干细胞（iPSCs）、间充质干细胞等的传代与单细胞制备

原代细胞培养：神经元、成纤维细胞、内皮细胞、肝细胞等敏感原代细胞的消化分离

流式细胞分析：需要保持细胞表面抗原完整性的免疫表型分析和细胞分选

单细胞测序：制备单细胞悬液用于单细胞 RNA 测序等下游分析

病毒学检测：病毒生长分析中的细胞解离

生物反应器放大：大规模细胞培养中的细胞收获

细胞冻存与复苏：经 Accutase® 处理的细胞在冻存后表现出更佳的复苏效果

使用说明

解冻与储存：

将 Accutase® 于 2-8°C 过夜解冻，或在冷水中解冻，切勿在 37°C 水浴中解冻，否则会影响酶活性

解冻后可在 4°C 保存长达 2 个月；长期储存建议分装后于 -20°C 或 -80°C 冻存，避免反复冻融

收到产品后，可重新冷冻或直接放入冰箱备用。请勿在温水浴中解冻

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