BD FACSCanto 淋巴细胞亚群 TBNK 六色检测方案（附参数）

对于已经或计划使用 BD FACSCanto™ / FACSCanto™ II 的实验室，BD Multitest™ 6-color TBNK 试剂（货号 662967，50T）是 成熟、标准化的六色淋巴细胞亚群方案之一。本文从方法学角度，拆解"样本—上机—分析—质控"全流程要点，帮助用户少走弯路、稳定出数。

一、方案原理与检测指标

采用六色直接免疫荧光法，单次管即可覆盖 T、B、NK 及 T 细胞亚群：

二、标准流程（参考）

1. 样本采集：外周 EDTA 抗凝血，建议采集后规定时间内处理，避免放置过久导致细胞活性下降。

2. 抗体孵育：取适量全血加入含 BD Multitest 6-color TBNK 的试管，避光孵育（按 IFU 温度与时间）。

3. 溶血与固定：使用配套溶血/固定步骤，制备可上机样本。

4. 绝对计数（可选）：使用 BD Trucount™ 管，基于已知微球数换算绝对计数。

5. 上机获取：在 FACSCanto™ 调用标准化补偿模板与获取模板，采集足够事件数。

6. 设门分析：以 CD45/SSC 设淋巴细胞门，再在门内分析 CD3、CD4、CD8、CD19、CD16/56 亚群。

三、设门与补偿的关键要点

四、绝对计数：为什么推荐 Trucount？

相较"相对百分比"推算，BD Trucount™ 绝对计数管以固定体积 + 已知微球数直接给出每微升的绝对细胞数，跨仪器、跨时点结果可比，特别适用于：

• HIV 患者 CD4⁺ 绝对计数（治疗指征与疗效评估）

• 移植后免疫重建监测

• 免疫抑制剂使用后的纵向随访

五、常见问题

Q：FACSCanto II 能用 662967 吗？

A：可以。该试剂专为 FACSCanto™ 与 FACSCanto™ II 设计，六色通道与仪器激光配置匹配。

Q：没有 Trucount 管能做绝对计数吗？

A：未配 Trucount 时通常仅获百分比；如需绝对计数，建议配套使用 Trucount 管。

Q：华雅思创是否提供上机技术支持？

A：提供补偿模板、分析模板及绝对计数方案咨询，协助方法学建立与验证。

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