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在细胞生物学研究中,难转染细胞系往往是科研进程的 “拦路虎"。从常出现转染效率不足 10% 的血液系统肿瘤细胞系,到对传统试剂高度耐受的神经细胞系等,这些细胞凭借特殊的生理结构与代谢机制,让许多科研人员在基因递送环节屡屡碰壁。而今天要为大家介绍的 ProteanFect®正是专为攻克这类 “顽固" 细胞系而生的创新工具,更有关于在转染过程中 “是否添加试剂 C" 的关键疑问解答,助力你的实验效率翻倍!
一、难转染细胞系的 “痛点", ProteanFect®精准击破!
难转染细胞系的转染难题,主要源于三大核心障碍:细胞膜屏障坚固,胞内降解机制活跃,细胞毒性敏感。传统脂质体、病毒载体常导致细胞凋亡,尤其对肿瘤细胞系、原代衍生细胞系影响显著。而 ProteanFect®通过全·球首·创的自组装蛋白纳米颗粒技术,从根源上解决了这些问题。它利用哺乳动物内源蛋白与核酸自组装形成的凝聚体,模拟细胞内部天然的转运与调控机制。进入细胞后,凝聚体能顺利被内吞、精准释放核酸,并最终通过细胞代谢自然清除载体蛋白。与传统脂质体或病毒载体不同,ProteanFect®并不“强行闯入",而是借助细胞“熟悉"的方式完成转染,从而在高效率与低毒性之间实现了难得的平衡。
二、实测数据说话:ProteanFect®在难转染细胞系中的 “硬实力"
为验证ProteanFect®对难转染细胞系的转染效果,西湖凝聚体科研团队针对此类典型难转细胞系进行系列验证结果令人惊艳。以 Jurkat T 细胞转染为例,转染 GFP-mRNA和GFP质粒后,48 小时内荧光阳性细胞比例可高达 50%-80% ;相比传统脂质体试剂,转染效率显著提升。这一数据体现了ProteanFect®对难转染细胞系的高效转染。
三、关键疑问:针对难转染细胞系,是否需要加试剂 C?
在使用 ProteanFect® 时,许多科研人员会纠结于配套的试剂C是否必要? 答案并非 “一刀切",可根据细胞系类型进行探索。试剂C能提升转染效率,尤其对原代细胞和一些难转细胞系效·果显·著。我们已验证部分细胞系是否需要添加试剂C,详见附表。
对于未验证的细胞,建议实验测试。具体操作为:不加试剂C,转染复合物需和细胞孵育45分钟;加试剂C则需加入8微升,与细胞孵育30分钟即可。最终转染方案应综合转染后细胞活力和效率确定。
四、操作小贴士:让 ProteanFect®在难转染细胞系中发挥最佳效果
1. 核酸质量把控:转染前需确保 DNA 无内毒素(建议使用无内毒素试剂盒提取),OD260/280 值在 1.7-1.9 之间;mRNA 需无 DNA 污染,且完整性良好。
2. 细胞状态准备:转染前 1 天更换新鲜培养基,确保细胞密度处于对数生长期,新复苏的细胞需传代 2-3 次后再进行转染。
结语
面对难转染细胞系的 “刁难",ProteanFect®凭借创新的蛋白纳米颗粒技术,打破了传统转染试剂的局限,为科研人员提供了高效、低毒的转染解决方案。如果你正在为 Jurkat T、K562、SH-SY5Y 等难转染细胞系的实验发愁,不妨试试 ProteanFect®—— 让 “难转染" 不再成为科研路上的绊脚石!
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