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分享重组人纤粘连蛋白片段包被培养板的制备

发布时间:2022-10-17

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将重组人纤粘连蛋白片段包被于培养板上,浓度20-100μg/ml的重组人纤粘连蛋白片段可达到4-20μg/cm2的包被密度。  
1.包被前,用无菌PBS将该溶液稀释至20-100μg/ml。【请提前计算重组人纤粘连蛋白试剂的用量,如:2.25ml浓度为20μg/ml的重组人纤粘连蛋白溶液放入直径为35mm的培养皿(9cm2)中时,用于包被的密度为5μg/cm2】  
注意:为避免重组人纤粘连蛋白片段丢失,请勿将PBS稀释的重组人纤粘连蛋白溶液过滤除菌。  
2.将适当体积(24孔板中每孔0.5ml,或6孔板每孔2ml。)的无菌重组人纤粘连蛋白溶液分配到每个板中,让板在室温下静置2小时或在4℃过夜。  
注意:在此步骤中应使用未经处理的细胞培养级组织培养板或培养皿。  
3.移除重组人纤粘连蛋白溶液,然后用适量含无菌2%牛血清白蛋白(BSA,FractionV)的PBS溶液进行封闭(24孔板中每孔0.5ml,或6孔板每孔2ml),让板在室温下静置30分钟。  
4.移除BSA溶液,用适当体积的HBSS/Hepes或PBS清洗一次。除去洗涤液后,即可使用。重组人纤粘连蛋白片段包被板可用封板膜密封,并在4℃下储存—周。