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教您分辨胎牛血清质量的优劣

更新时间:2021-11-23

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   市场上的胎牛血清种类繁多,鱼龙混杂,很多科研工作者,特别是刚接触细胞培养的人,难以分辨血清质量的优劣。本人根据十多年来血清生产销售的经验,总结如下:
  一、外观
  拿到胎牛血清,先接触的是血清外观,对于缺少细胞培养经验的人来说,外观的判断尤为重要
  1、颜色
  根据血红蛋白含量的不同,胎牛血清可表现出黄色或红色,我国的细胞培养用血清标准是不高于20mg/d,实际上, 血红蛋白含量的高低对血清并无直接影响,这个指标的意义在于能体现出采血过程的严谨规范程度,良好的操作能降低血清的游血。国产血清的采血点很分散。大多是由屠户采血后马上离心收集,所以很少会有溶血,表现出明亮的蜡黄色。 当然,国产血清也很少有标准意义上的胎牛业消。进口胎牛血消或多或少总有点浴血,因为真正的胎牛血清凝血功能差,红细胞容易破裂。总的来说。 国产的血清呈现出蜡黄。进口的血清,质量*好的呈现出谈黄、微红色,如SERANA   S-FBS-US-015. 差点的呈现出硫红色或鲜红色。当然,热天活血清或保存不当的血清, 由于血红蛋白的破坏氧化, 会呈现出暗红,甚至咖啡色。
  2、沉症
  很多血清客户, 会发现进门血清有沉视, 从面怀疑血请的质量问题,这是没有根据的。血清中的沉定是由纤维蛋白的凝鉴产 对面清动量沒有任何影明。 沉浪的产生原因很多。 家的加工生产方式密切相关。国产的血清,大多来自北方,由于价格低廉,保存环境都不好,从采血、冷冻、运输到生产会经过多次冻融,每次冻融过程,就会析出部分纤维蛋白沉淀,这样,血清成品过滤后看起来反而更加的“干净”,很少有沉淀产生。
  进口的胎牛血清,过滤分装前很少会反复冻融,生产后的成品也是清激的,但随着时间的推移,血清中的大量纤维蛋白会析出形成沉淀。当然,进口的新生牛血清,一般牛龄都在2周左右,血清中的各种蛋白含量明显偏高,生产后血清可能会浑独,甚至有大量沉淀。当然,购买回来的血清都是冰冻状态,使用时需要融化,融化过程*好在温度较低的状态下慢慢进行,否则沉淀相对较多,虽然沉淀并不直接影响血清的质量,但对细胞的显微观察有一定的阻碍。
  3、澄清度
  进口胎牛血清由于蛋白和脂类等物质含量低,表现为稀薄、清淡,而国产血清,因为绝大多数是新生牛血清,相对而言更加粘稠,颜色略深,这对于初步接触血清的人很难判断,但把两者进行对比,可容易分辨。
  胎牛血清注意事项:
  1. 血清解冻与存放:-20℃取出后建议放入2~8℃冰箱中解冻约,每隔一段时间轻轻摇晃均匀,不可直接放入温度较高处解冻,避免因温度改变太大,造成蛋白质凝集而出现沉淀,血清的质量下降。若短期无法用完一瓶,建议无菌分装,再放回冷冻,避免反复冻融。4℃长时间保存后血清中的变性脂蛋白及纤维蛋白,形成絮状物质变差。
  2. 血清是否灭活:加热可灭活血清中补体系统,在极少数情况下(培养ES细胞,平滑肌细胞时)建议灭活,在培养其余细胞时不建议灭活血清。血清灭活非常容易产生沉淀,如必须灭活请按56℃,30 min,轻微摇晃原则操作,灭活温度高、时间长、摇晃不均都容易产生沉淀。
  3.无血清培养基:无血清培养基在结果重复性、细胞体外分化方面有优势,但是,血清仍然是培养液中最基本的添加物,尤其是在原代培养或细胞生长状态不良时,常常会先使用有血清的培养液进行培养,待细胞生长旺盛后再换成无血清培养液。