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细胞冻存袋分享细胞冻存方法

发布时间:2021-10-18

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   OriGen细胞冻存袋产品简介:
  CryoStore? 袋设计用于低温冷冻血液成分。OriGen 多室冷冻袋有二个型号,CS30M9和CS24M9。每个分室的大冻存容积是6毫升。CS30M9有五个分室,总的大冷冻容积是30毫升。CS24M9有四个分室,总的大冷冻容积是24毫升。这二个型号的多室冷冻袋都可以保存在现有CS50冷冻袋使用的冷冻盒中。
  细胞冻存袋分享细胞冻存方法,包括以下步骤:
  (1)将培养的细胞转移至离心管中,在200-500g条件下,离心5-8min,弃掉上清液;
  (2)将离心后的细胞团先用DPBS重悬,确认细胞团被*打碎,在磁力架上静止2-5分钟,实现细胞跟磁珠的分离;
  (3)用移液管将细胞悬液转移至新的离心管中,重复去磁珠操作两次;
  (4)将清除磁珠后的细胞悬液在200-500g条件下,离心5-8min,弃掉上清液,备用;
  (5)根据需要冻存的细胞总数量,计算冻存介质的体积,将细胞重悬于冻存介质中;
  (6)将细胞分装于冻存管或者冻存袋中,放置于-80℃超低温冰箱中缓慢冷冻8-18小时,或者放置于程序降温仪中按照相应程序降温至-85℃;降温结束后,将细胞冻存管或者冻存袋转移至液氮中长期保存。
  回输需要时,在液氮条件下运送至治疗医院,在37℃条件下快速解冻后,可以直接回输给治疗病人。
  所述步骤5中的冻存介质由氯化钠、二甲基亚砜、葡萄糖、人血白蛋白、低分子葡聚糖和RPMI-1640基础培养基组成,其中氯化钠的质量浓度为0.45-0.9%,二甲基亚砜溶液的体积浓度为5-15%,葡萄糖的质量浓度为5-20%、人血白蛋白的质量浓度为10-50%,低分子葡聚糖的质量浓度为5-20%。
  优选的,所述步骤5中的冻存介质,其中氯化钠的质量浓度为0.9%,二甲基亚砜溶液的体积浓度为10-15%,葡萄糖的质量浓度为5-10%、人血白蛋白的质量浓度为10-30%,低分子葡聚糖的质量浓度为5-10%。
  进一步优选的,所述步骤5中的冻存介质,其中氯化钠的质量浓度为0.9%,二甲基亚砜溶液的体积浓度为10%,葡萄糖的质量浓度为5%,人血白蛋白的质量浓度为10%,低分子葡聚糖的质量浓度为5%。
  所述步骤5中细胞的冻存密度为1×106个/ml-500×106个/ml。
  以上知识仅供参考,希望对您有所帮助!